sem土壤微生物分析

1、不知哪位可以提供土壤微生物分析方法手册这本书，特急！！

土壤微生物分析方法手册．北京：农业出版社，1986．91～l10. 关松荫．土壤酶及其研究法．北京农业出版社，1 986．274￣330 ...

书 名： 土壤微生物分析方法手册

关键词： 土壤 微生物 分析

作 者： 许光辉

语 言： 中文
ISBN：

分类号： N62:S15
类 别： 工具类

价 格： 2.15
出版日期： 1986-2-9

出版社： 北京 农业出版社

2、测土壤微生物群落分布要取多少土壤样品

如果用高通量测序的方法测定土壤微生物群落，提取DNA的时候，0.5 g代表性土样就够了，加上3-5个重复，5 g绝对够了。
但是，你要考虑土壤样品的代表性，田间土壤就要用网格布点法、梅花布点法、蛇形布点法等采样，如果考虑剖面，样品就会很多。然后，把这些样品混合，四分法取样，称量，提取DNA。

3、土壤微生物聚类分析核心微生物图怎么看

微生物物种多样性主要从对微生物类群即细菌、
真菌和放线菌这三大类群的数量及其比例组成来描述微生物多样性，
或者按照微生物在生态系统中的作用将其划分成不同的功能群(function group)，
通过某一功能群中物种的分类及其数量来研究土壤微生物多样性，
如对土壤中的产甲烷细菌、固氮菌、根瘤菌等的多样性进行研究。

4、简述土壤微生物对土壤pH的影响,并分析它们对土壤肥力的影响？

土壤里的微生物对土壤有何利弊
土壤中微生物数量多、繁殖快、活动性强，对植物有非常重要的影响，主要表现在以下方面：
土壤微生物是生态系统中的分解者，它们使有机质分解，释放养分，供植物利用。另外，有些土壤微生物还能直接对岩石进行分解，如硅酸盐菌能分解土壤中的硅酸盐，并分离出高等植物能吸收的K。
土壤微生物生命活动产生的生长激素以及维生素类物质对植物的种子萌发和正常的生长发育能产生良好影响。
某些微生物在不同程度上具有抑制病毒和致病性细菌、真菌的作用，在一定条件下可以成为植物病原菌的拮抗体。某些微生物还能把土壤中有毒的H2S, CH4等转化成无毒物质，如硫化细菌能将H2S转化为硫酸盐。
土壤中的某些真菌还能与某些高等植物的根系形成共生体，称为菌根。有的真菌还具有固氮性能，能改善植物的氮素循环。
但是，土壤微生物也有对植物生长不利的一面，如某些微生物本身就是致病的病原菌。在某些条件下，有些微生物的活动还能引起养分损失。

5、研究土壤情况与分析土壤微生物组成结构有何关系

土壤微生物活性测定的结果不能算是土壤微生物呼吸。
土壤微生物活性表示土壤中整个微生物群落或其中的一些特殊种群状态，可以反映自然或农田生态系统的微小变化。土壤微生物活性的表征量有:微生物量、C/N、土壤呼吸强度和纤维呼吸强度、微生物区系、磷酸酶活性、酶活性等。
土壤呼吸强度和纤维分解强度是土壤微生物活性的重要标志，反映了土壤中微生物活性及对有机质残体分解的速度和强度。纤维素分解强度采用埋片法；呼吸强度采用碱吸收滴定法。土壤微生物活性用土壤呼吸CO2测定法（5g鲜土于310mL试剂瓶中，22℃24h测CO2释放量(用exH23os红外CO:分析仪测定)）。直接测定土壤呼吸的方法基本可分为静态气室法、动态气室法和微气象法三种。
土壤酶大多数来自土壤微生物，在土壤中已发现50—60种酶，它们参与并催化土壤中发生的一系列复杂的生物化学反应。如水解酶和转化酶对土壤有机质的形成和养分循环具有重要的作用。已有研究表明，土壤酶活性和土壤结构参数有很好的相关性。土壤微生物酶主要有脱氢酶、磷酸酶、精氨酸酶及芳基硫酸酯酶等。

6、土壤微生物的新方法

用生物化学技术能快速地检测土壤酶活性，使土壤酶学研究在60年代后期至80年代比较热门，其中尿酶、磷酸酶、脱氢酶在土壤中的含量和变化规律研究较多。但土壤酶测定方法用于土壤微生物研究的一个致命弱点是不能直接的反映土壤实际微生物状况。Visser等对酶检测用于土壤微生物群落和土壤质量评价提出了怀疑。Skujins(1978)认为脱氢酶本身的生物化学特征决定了它不可能以胞外酶状态存在于土壤中。为了解决土壤酶测定中的评判问题，Beck（1984）提出了土壤微生物如微生物量（microbialbiomass）、还原酶（rectase）、水解酶（hydrolase）的适宜指标，然而，这些指标从来没有被广泛采用。Beck（1984）和Trasar-Cepedaetal.（1998）认为把酶用于土壤质量评价指标是值得怀疑的，而且缺乏常规可行的酶测定手段，存在药品昂贵等问题[7，8]。
Community-levelphysiologicalprofiling(CLPP)是由GarlandandMills（1991）提出的另一种酶分析方法，微生物群落降解95种不同单一碳源的能力可一次分析，其中BIOLOGGN微平板较多应用于研究土壤和环境微生物区系。作者采用BIOLOGGN微平板培养分析施用生态有机肥对土壤微生物多样性和番茄青枯病的影响，结果表明，连作地施用生态有机肥后，番茄青枯病显著降低，土壤微生物多样性显著提高。由于真菌、放线菌的代谢反应不能分解四氮叠茂，此方法只能检测微生物群落细菌（主要是革兰氏阴性菌）中快速生长的那部分微生物信息。不同的微生物对同一碳源的利用能力是有差异的，微生物对不同单一碳源的代谢指纹差异并不能简单地归纳为微生物群落数量和结构的差异，而且土壤微生物在BIOLOG系统中生长时，由于温育环境的改变引起微生物对碳底物实际利用能力的改变，同时在温育过程中存在适应性问题如代谢补偿、代谢适应等。但CLPP方法因快速、简便而受到人们的欢迎，因而有专用于土壤和环境微生物生态研究的生态微平板（EcoPlates）（Insam，1997）。土壤酶测定方法至今没有一个标准的参数和测定标准，不能对土壤微生物生态功能一个准确的答案，若要充分分析土壤特征，了解不同土壤之间的差异，一定要与其他的方法相配合。 土壤微生物是土壤生态系统中库（pool）和流的一个巨大的原动力。土壤酶测定一般要在适宜的条件下测定，不能作为土壤物流的原位评价。库和流的计算对土壤微生物学家来说很重要，测定土壤微生物呼吸（CO2的释放量），是较好的微生物群落总代谢活性指标。
N、NO3输入引起土壤酸化，甚至引起地下水的N污染。氮的分配（N2O、NO等）对气候变化和臭氧层破坏有极大影响，生物固氮对缓解矛盾有重要的意义，同时也提高农作物产量和减少人类饥饿。从1970年以来，共生和非共生固氮研究很热烈。土壤微生物学家应用分子生物学技术在转基因作物和转基因工程菌方面研究，大大提高了生物固氮效果。许多传统方法，如N矿化测定，硝化潜力或用于反硝化测定的乙炔抑制方法仍然广泛使用。应用15N放射性标记方法可详细地了解土壤中或土壤微生物群落中的N分配和去向。
土壤具有复杂的空间异质性，大多数养分流测定方法不适于田间测定，局限于实验室模拟，目前有较好的地理信息系统软件来统计和分析这些数据。Bruckner等（1999）测定土壤理化和生物指标，研究了温带松果类森林土壤的的空间差异，发现土壤中某些养分转化过程需要在一定的生态点进行，如仅在一定团粒粒级范围内进行。Rasiah等（1999）研究发现不同农业措施会引起土壤紧实度、质地和有机质特性变化。Stenberg等（1998）研究26种不同性质土壤的微生物状况，也证明土壤有巨大的异质性。

7、如何调查土壤中微生物种类

按照我理解的“土壤中微生物的种类”是指古菌、细菌、真菌等生命体而不包括藻类、原生动物等低等动植物.
土壤中微生物的种类数量的调查属于微生态区系分析的范畴.
一般说来,我们所开展的研究工作主要采用以下两类方法进行研究分析：
1、经典的选择培养法：
即采用选择培养的方法,对土壤样品中的细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌等几大类微生物进行分类培养,还可以采用详细的选择培养方式比如无氮培养基培养固氮微生物、利用MPN法测定氮循环微生物等等,从功能角度再细分一下微生物的种类组成；还可以通过寡营养、富营养、长周期培养等方法做进一步详细的分析.
此类方法工作量大,分析精度和全面性都有一定的局限性.但同时是任何层面的研究都不可以忽略的方式方法,是获得微生物菌种资源纯培养以进行深入研究的唯一方法.
2、分子微生态学方法
是基于DNA分析和测序基础上的分子微生态学研究方法,常用的有DGGE（变性梯度凝胶电泳）、克隆文库构建、T-RFLP以及宏基因组技术,对样品中的DNA进行电泳乃至测序分析,从分子水平确定样品中微生物的种类和数量.
从全面性和深度以及工作效率方面都教常规方法有大幅度提升,但目前仍然有不成熟的地方.另外其成本远高于常规方法.

8、土壤微生物数量的测定方法

取一定重量的土壤，称取1g，置于100ml无菌水中，充分振荡，然后离心，取上清液，就得到土壤浸出液（可以看做土壤中的微生物全部转移至水中）。然后做梯度稀释，取一定稀释度的溶液，涂平板，培养后数菌落数，然后乘上稀释倍数，就可得到1g土壤中该微生物的数量。

例如，你在稀释10的7次方的平板上数出了15个菌落，则1g土壤中微生物数量为1.5×10的8次方个。

9、土壤微生物多样性韦恩图怎么分析小木虫

如果想做多样性的话 就用二代测序吧 根据结果可以做多样性分析 如果想要提纯菌种 那就要好好选培养基了 99%的土壤细菌是不可培养的 一般来说PDA足够了 细菌真菌都可以长 如果想要真菌的话在PDA中加2%土霉素