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扫描电镜sem样品制作方法步骤

发布时间:2020-08-12 18:05:43

1、请教高手:扫描电镜植物样品制备的详细步骤

切取大小约 5mm × 5mm ,长 3mm ~4mm 的茎组织块。
用 3 % 戊二醛固定 2 h ,漂洗后 ,经 35 % 、 50 % 、 60 % 、
70 % 、 95 % 、 100 % 、 100 %各 l h 的乙醇系列脱水 , 过
渡到纯二甲苯 , 在室温浸腊 ( 溶点 53 ℃ ) 24 h , 移入
40 ℃温箱逐步升温至 56 ℃,加石腊至饱和 ,3 h 后将
样品移入溶化的石腊中 ( 换三次 , 每次 2 h) 包埋成
块 ,迅速冷却后固定在切片机的样品座上 ,用切片机
对需观察的面进行修整 , 把修整好的样品转入二甲
苯中脱腊 ( 换三次 ,每次 1 h) ,从二甲苯过渡至无水
乙醇 ,再过渡至醋酸异戊酯 , 经二氧化碳临界点干
燥、镀金、电镜观察。

2、做sem有哪些具体的步骤和方法?

SEM搜索引擎营销由于其精准性及低广告成本优势,成为国内及国际客户重要的网络营销方式。下面的文章中,我大致讲解了,我们应该以什么样的步骤去做搜索营销:[如果您还知道SEM是什么,请访问我的博文,SEM是什么]? ]

第一步:了解产品/服务针对哪些用户群体
第二步: 了解目标群体的搜索习惯 [目标群体习惯使用什么关键词搜索目标产品?]

第三步: 目标群体经常会访问哪些类型的网站

[b]
第四步:分析目标用户最关注产品的哪些特性 [影响用户购买的主要特性,例如品牌、价格、性能、可扩展性、服务优势等等]

[b]第五步:竞价广告账户及广告组规划 [创建谷歌及百度的广告系列及广告组;需要考虑了管理的便捷,及广告文案与广告组下关键词相关性]

第六步:相关关键词的选择[我们可以借助谷歌关键词分析工具,及百度竞价后台的关键词分析工具,这些工具都是根据用户搜索数据为基础的,具有很高的参考价值]

[b]第七步:撰写有吸引力的广告文案
在广告文字中包括关键字,使相关性更高,并能抓住客户的眼球

突出产品/服务的竞争优势

在广告文字中包括号召性语言,让客户了解点击到您网站之后的下一步(例如:购买、定购、下定单、注册、闻讯、致电、了解更多)

第八步:内容网络投放 [如果您的预算有限,暂时不考虑投放内容广告,直接跳过这一步]

第九步:目标广告页面的设计[LANDING PAGE设计,关于LANDING PAGE设计技巧,大家可参考博文:8个技巧让设计转换为成功的销售 ]

包含重要的到下一步动作的引导,例如如何购买,了解更多

涵盖主要内容的引导链接

更好的用户体验(设计更友好的导航,例如设计不同类型用户的访问入口,进入之后显示适合这些用户的产品和服务)

第十步:基于KPI广告效果转换评估 (首先我们要实施基于用户行为分析的网站分析,例如谷歌分析、雅虎统计、omniture SiteCatalys ,如何您还不知道如何定义网站KPI,请访问我的博文,网站分析实践-KPI度量的定义)

只需要十个步骤,我们就能清楚了解到针对自己的产品及服务,我们应该怎么去做SEM搜索营销.不过这个方法只适合中小企业的广告主,对于大型广告客户需要分析更深层的用户行为,及广告点击流的数据分析。 好了,十个步骤已经说完了?听说耐特康赛SEM做的不错还得到了百度的认证.

3、怎样把要做扫描电镜的液体样品变成固体样品?

扫描电镜观察样品要求在高真空中进行。无论是水或脱水溶液,在高真空中都会产生剧烈地汽化,不仅影响真空度、污染样品,还会破坏样品的微细结构。因此,样品在用电镜观察之前必须进行干燥。干燥的方法有以下几种:
(一) 空气干燥法
空气干燥法又称自然干燥法,就是将经过脱水的样品,让其暴露在空气中使脱水剂逐渐挥发干燥。这种方法的最大优点是简便易行和节省时间;它的主要缺点是在干燥过程中,组织会由于脱水剂挥发时表面张力的作用而产生收缩变形。因此,该方法一般只适用
于表面较为坚硬的样品。
(二) 临界点干燥法
临界点干燥法是利用物质在临界状态时,其表面张力等于零的特性,使样品的液体完全汽化,并以气体方式排掉,来达到完全干燥的目的。这样就可以避免表面张力的影响,较好地保存样品的微细结构。此法操作较为方便,所用的时间也不算长,一般约2~3小
时即可完成,所以是最为常用的干燥方法。但用此法,需要特殊仪器设备。
临界点干燥是在临界点干燥仪中进行的,操作步骤如下:
1.固定、脱水:按常规方法进行。如样品是用乙醇脱水的,在脱水至100%后,要用纯丙酮置换15~20分钟。
2.转入中间液:由纯丙酮转入中间液醋酸异戊酯中,时间约15~30分钟。
3.移至样品室:将样品从醋酸异戊酯中取出,放入样品盒,然后移至临界点干燥仪的样品室内,盖上盖并拧紧以防漏气。
4.用液体二氧化碳置换醋酸异戊酯:在达到临界状态(31(C , 72.8大气压)后,将温度再升高10(C,使液体二氧化碳气化,然后打开放气阀门,逐渐排出气体,样品即完全干燥。
(三) 冷冻干燥法
冷冻干燥法是将经过冷冻的样品置于高真空中,通过升华除去样品中的水分或脱水剂的过程。冷冻干燥的基础是冰从样品中升华,即水分从固态直接转化为气态,不经过中间的液态,不存在气相和液相之间的表面张力对样品的作用,从而减轻在干燥过程中对样
品的损伤。冷冻干燥法有两种,即含水样品直接冷冻干燥和样品脱水后冷冻干燥。
1.含水样品直接冷冻干燥法
1.1 取材固定:按常规方法进行。
1.2 置于冷冻保护剂中:将样品置于冷冻保护剂中浸泡数小时。常用的冷冻保护剂为10%~20%二甲基亚砜水溶液,或15%~40%甘油水溶液。
1.3 骤冷:将经过保护剂处理的样品迅速投入用液氮预冷至(150(C的氟利昂冷冻剂中,使样品中的水分很快冻结。
1.4 干燥:将已冻结的样品移到冷冻干燥器内已预冷的样品台上,抽真空,经几小时或数天后,样品即达到干燥。
本方法不需要脱水,避免了有机溶剂对样品成分的抽提作用,不会使样品收缩,也是较早使用的方法。但是,由于花费时间长,消耗液氮多,容易产生冰晶损伤,因此未被广泛应用。
2.样品脱水后冷冻干燥
样品用乙醇或丙酮脱水后过渡到某些易挥发的有机溶剂中,然后连同这些溶剂一起冷冻并在真空中升华而达到干燥。和前一种方法比较,本方法的优点是不会产生冰晶损伤,
且干燥时间短。不足之处是有机溶剂对样品成分有抽提作用,造成部分内含物丢失。乙腈(acetonitrile)真空干燥法:这是一种利用乙腈在急速蒸发时会冷却固化的性质将样品干燥的方法。其操作步骤如下:
(1). 固定、水洗:按常规方法进行。
(2). 乙腈置换:使用50%?70%?80%?90%的乙腈水溶液置换,最后用100%乙腈代替,每步骤15~20分钟。
(3). 干燥:至纯乙腈时,放入真空镀膜台抽真空,乙腈和样品在真空中很快致冷而被冻结(冻结的温度为(45(C),变成冰状固体。然后继续抽真空,使冻结的乙腈升华,约需30分钟,样品即达干燥。
样品干燥后要粘在样品台上。对于不镀膜而直接观察的样品,必须用导电胶来粘固;对于要镀膜的样品,则可以用胶水或万能胶来代替,微细的样品如粉末、纤维等也可用双面胶纸来粘贴。

4、扫描电镜时,真菌样品如何进行处理?

用普通的SEM是无法看的,因为样品必须干燥,还要镀金。而且样品室里是高真空的。经过这些步骤之后,你的真菌样品的形貌早被严重破坏啦。我也用SEM看过细胞,不是破了就是完全扁平啦,没用。
你得用环境扫描电子显微镜才行,它可以做液体的样品,而且不需要镀金。直接就能看。

5、扫描电镜样品的处理

关键看你的实验目的是什么。

如果A样品和B样品是两个单独的实验,不用做横向对比,那么用不同的制样方法没有什么问题。

如果两个样品在合成制备过程中用了不用的方法或者条件,要用SEM做横向比对,制备的结果。那么,最好用同样的制样方法。否则,即使你在SEM下看到了明显不同的结果,你也难以判断是由于SEM制样方法不同造成的,还是,由于合成制备方法不同造成的影响。

如果超声是你样品合成制备过程的一部分,因而,有必要比较超声前和超声后样品的区别。那么,对于两个平行样品,一个样品经过超声处理,一个样品直接干燥,是很合理的实验安排。可以探讨超声过程(工艺)对最终结果的影响。

总之,对于SEM仪器或者这个表征手段来说,超声或者不超声,做出来的样品,是可以放到一起观察的。问题的关键在于你想知道什么。

6、有没有用过扫描电镜(SEM)的呀?我想看下我筛出来细菌的样子,但是不知道怎么对 样品进行处理!

晕,那样能看到才怪。sem样品要有一定导电性才行,不然电荷聚集你什么也看不到。楼上正解

7、扫描电镜sem的主要原理是什么?测试过程需要重点注意哪些操作

电镜的原理是:电子枪发出电子束打到样品表面,激发出二次电子、背散射电子、X-ray等特征信号,经收集转化为数字信号,得到相应的形貌或成分信息。
测试注意事项:
1、新人找别人帮忙测试时,
明确自己的测试内容,如何样品前处理,测试时间,然后跟测试相关人员联系确定能否满足你的测试需求
2、新人自己操作测试时,
明确自己的测试内容,如何样品前处理,测试时间,
测试时注意样品干燥洁净,操作时样品和样品台避免撞到探头

8、扫描电镜的生物样品制备

没什么大差别,做生物(特别是反应活体形态学特征的)可以先固定,再扫描;如果只是考察微结构,可以干燥(固定)再喷金扫描。

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