導航:首頁 > 萬維百科 > 纖維素酶活cms溶液

纖維素酶活cms溶液

發布時間:2020-09-09 08:37:27

1、纖維素酶溶液具體怎麼配啊?ph,為保存酶活性,需要添加一些特別的試劑嗎? 不勝感激啊!!!!

按照正常的溶液配置方法來配。只是注意,最好使用避光的褐色容量瓶,以及儲存在避光的褐色試劑瓶中。pH的話,根據我的經驗,在6至8都沒問題。保存酶活性可以加些弱鹼性的緩沖液,如 碳酸氫鈉、檸檬酸鈉 等。

2、纖維素酶活的活性檢測方法及使用說明是什麼

這些是在索萊寶官網上借鑒的:(僅供參考)
纖維素酶活的活性檢測方法
1. 纖維素CMC酶
1.0標題
用3.5一二硝基水楊酸法測定纖維素CMC酶活性單位。 2.0范圍
生產分析和質量控制部門適用。 3.0原理
纖維素CMC酶(EC3.2.1.4)水解羧基纖維素分子中β-1.4葡萄糖苷鍵,釋放出的還原糖(以葡萄糖計)與3.5二硝基水楊酸(DNS)反應,產生顏色變化,這種顏色變化與釋放還原糖(以葡萄糖計)的量成正比關系,即與酶樣品中的酶活性成正比。通過在550nm的光吸收值查對標准曲線(以葡萄糖為標准物)可以確定還原糖產生的量,從而確定出酶的活力單位。 4.0試劑
4.1無水醋酸鈉(分析純) 4.2冰醋酸(分析純) 4.3 3.5-二硝基水楊酸 4.4無水葡萄糖
4.5四水酒石酸鉀鈉(分析純) 4.6氫氧化鈉(分析純) 4.7重蒸苯酚(分析純) 4.8無水亞硫酸鈉(分析純) 4.9疊氮化鈉(分析純) 4.10羧甲基纖維素鈉 5.0儀器
5.1水浴鍋(恆溫)50±1℃ 5.2電熱乾燥箱80±1℃ 5.3 722型分光光度機計 5.4分析天平感量0.1㎎ 5.5一級玻璃製品 5.6電冰箱 6.0試劑的准備
6.1乙酸-乙酸鈉緩沖溶液(PH=4.8)
溶液A:量取冰醋酸6ml,定容至1000ml,製成0.1M醋酸鈉溶液。 溶液B:稱取8.2g醋酸鈉,溶解後容至1000ml,製成0.1M醋酸鈉溶液。 以A:B=4:6的比例混合,低溫冷藏備用。 6.2 DNS試劑:
溶液A:稱分析純NaOH 104g溶於1300ml水中,加入30g分析純3.5一二硝基水楊酸。 溶液B:稱分析純酒石酸鉀鈉910g,溶於2500ml熱水中,再稱取25g重蒸苯酚和25g無水亞硫酸鈉加入酒石酸鉀鈉溶液。
將A、B溶液混合,定容至5000ml,貯存於棕色瓶中,暗處放置一星期後可使用。 6.3 CMC溶液:用羧甲基纖維素鈉(CMC)以PH4.8醋酸緩沖液配成1%的溶液。 7.0標准曲線製作:
7.1無水葡萄糖80℃烘乾至恆重。
7.2准確稱取1.000g溶於1000ml水中,加10mg疊氮化鈉防腐,4℃冷藏備用。 7.3標准葡萄糖曲線製作

纖維素酶的作用原理
1、纖維素酶在提高纖維素、半纖維素分解的同時,可促進植物細胞壁的溶解使更多的植物細胞內溶物溶解出來並能將不易消化的大分子多糖、蛋白質和脂類降解成小分子物質有利於動物胃腸道的消化吸收熊譜成1996.
2、纖維素酶制劑可激活內源酶的分泌,補充內源酶的不足,並對內源酶進行調整,保證動物正常的消化吸收功能,起到防病,促生長的作用(張國立,1996).
3、消除抗營養因子,促進生物健康生長.半纖維素和果膠部分溶於水後會產生粘性溶液,增加消化物的粘度,對內源酶造成障礙,而添加纖維素酶可降低粘度,增加內源酶的擴散,提高酶與養分接觸面積,促進飼料的良好消化.
4、纖維素酶制劑本身是一種由蛋白酶、澱粉酶、果膠酶和纖維素酶等組成的多酶復合物,在這種多酶復合體系中一種酶的產物可以成為另一種酶的底物,從而使消化道內的消化作用得以順利進行.也就是說纖維素酶除直接降解纖維素,促進其分解為易被動物所消化吸收的低分子化合物外,還和其他酶共同作用提高奶牛對飼料營養物質的分解和消化.
5、纖維素酶還具有維持小腸絨毛形態完整,促進營養物質吸收的功能.

3、纖維素酶直接用水溶接會不會影響酶活

這些是在索萊寶上借鑒的:(僅供參考)

纖維素酶活的活性檢測方法

纖維素CMC酶 

1.0標題 

用3.5一二硝基水楊酸法測定纖維素CMC酶活性單位。 2.0范圍 

生產分析和質量控制部門適用。 3.0原理 

纖維素CMC酶(EC3.2.1.4)水解羧基纖維素分子中β-1.4葡萄糖苷鍵,釋放出的還原糖(以葡萄糖計)與3.5二硝基水楊酸(DNS)反應,產生顏色變化,這種顏色變化與釋放還原糖(以葡萄糖計)的量成正比關系,即與酶樣品中的酶活性成正比。通過在550nm的光吸收值查對標准曲線(以葡萄糖為標准物)可以確定還原糖產生的量,從而確定出酶的活力單位。 4.0試劑 

4.1無水醋酸鈉(分析純) 4.2冰醋酸(分析純) 4.3 3.5-二硝基水楊酸 4.4無水葡萄糖 

4.5四水酒石酸鉀鈉(分析純) 4.6氫氧化鈉(分析純) 4.7重蒸苯酚(分析純) 4.8無水亞硫酸鈉(分析純) 4.9疊氮化鈉(分析純) 4.10羧甲基纖維素鈉 5.0儀器 

5.1水浴鍋(恆溫)50±1℃ 5.2電熱乾燥箱80±1℃ 5.3 722型分光光度機計 5.4分析天平感量0.1㎎ 5.5一級玻璃製品 5.6電冰箱 6.0試劑的准備 

6.1乙酸-乙酸鈉緩沖溶液(PH=4.8) 

溶液A:量取冰醋酸6ml,定容至1000ml,製成0.1M醋酸鈉溶液。 溶液B:稱取8.2g醋酸鈉,溶解後容至1000ml,製成0.1M醋酸鈉溶液。 以A:B=4:6的比例混合,低溫冷藏備用。 6.2 DNS試劑: 

溶液A:稱分析純NaOH 104g溶於1300ml水中,加入30g分析純3.5一二硝基水楊酸。 溶液B:稱分析純酒石酸鉀鈉910g,溶於2500ml熱水中,再稱取25g重蒸苯酚和25g無水亞硫酸鈉加入酒石酸鉀鈉溶液。 

將A、B溶液混合,定容至5000ml,貯存於棕色瓶中,暗處放置一星期後可使用。 6.3 CMC溶液:用羧甲基纖維素鈉(CMC)以PH4.8醋酸緩沖液配成1%的溶液。 7.0標准曲線製作: 

7.1無水葡萄糖80℃烘乾至恆重。 

7.2准確稱取1.000g溶於1000ml水中,加10mg疊氮化鈉防腐,4℃冷藏備用。 7.3標准葡萄糖曲線製作

纖維素酶的作用原理 

1、纖維素酶在提高纖維素、半纖維素分解的同時,可促進植物細胞壁的溶解使更多的植物細胞內溶物溶解出來並能將不易消化的大分子多糖、蛋白質和脂類降解成小分子物質有利於動物胃腸道的消化吸收熊譜成1996.

2、纖維素酶制劑可激活內源酶的分泌,補充內源酶的不足,並對內源酶進行調整,保證動物正常的消化吸收功能,起到防病,促生長的作用(張國立,1996).

3、消除抗營養因子,促進生物健康生長.半纖維素和果膠部分溶於水後會產生粘性溶液,增加消化物的粘度,對內源酶造成障礙,而添加纖維素酶可降低粘度,增加內源酶的擴散,提高酶與養分接觸面積,促進飼料的良好消化.

4、纖維素酶制劑本身是一種由蛋白酶、澱粉酶、果膠酶和纖維素酶等組成的多酶復合物,在這種多酶復合體系中一種酶的產物可以成為另一種酶的底物,從而使消化道內的消化作用得以順利進行.也就是說纖維素酶除直接降解纖維素,促進其分解為易被動物所消化吸收的低分子化合物外,還和其他酶共同作用提高奶牛對飼料營養物質的分解和消化.

5、纖維素酶還具有維持小腸絨毛形態完整,促進營養物質吸收的功能.

4、1%羧甲基纖維素鈉溶液的配製問題

羧甲基纖維素是水溶性的,所以,50%的乙醇肯定溶解不了啊。或許你可以先用一定比例水溶解了,然後再緩慢滴加入相當比例的乙醇。或者選用高取代度的羧甲基纖維素。

5、求助:纖維素合成酶 酶活性測定方法

酶活力測定常用的方法有終點法和動力學方法兩類。

終點法
測定完成一定量反應所需的時間,如α-澱粉酶的活力測定。因為碘對澱粉呈現藍色反應,當澱粉溶液中加入澱粉酶後,碘的藍色反應消失而呈現紅棕色;碘對澱粉顏色反應消失的時間可表示澱粉酶活力的大小。碘對澱粉顏色反應消失花的時間越短,表示酶的活力越高。

動力學方法
測定一定時間內所起的化學反應量。
①比色法 如果酶反應的產物可與特定的化學試劑反應而生成穩定的有色溶液,且生成顏色的深淺與產物的濃度在一定的范圍內有線性關系可用此法。如蛋白酶的活力測定:蛋白酶可水解酪蛋白,產生的酪氨酸可與福林試劑反應生成穩定的藍色化合物,在一定的濃度范圍內,所生成藍色化合物顏色的深淺與酪氨酸的量之間有線性關系,可用於定量測定。
②量氣法 主要用於有氣體產生的酶促反應。如氨基酸脫羧酶、脲酶的活力測定。產生的二氧化碳量可用特製的儀器如瓦氏呼吸儀測定之。根據氣體變化和時間的關系,即可求得酶反應的速度。
③滴定法 如果產物之一是自由的酸性物質可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解,脂肪酸的增加量代表脂肪酶的活力。
④分光光度法 利用底物和產物光吸收性質的不同,可直接測定反應混合物中底物的減少量或產物的增加量。幾乎所有的氧化還原酶都使用該法測定。如還原型輔酶Ⅰ(NADH2)和輔酶Ⅱ(NADPH2)在340nm有吸收,而NAD和NADP在該波長下無吸收,脫氫酶類可用該法測定。該法測定迅速簡便,自動掃描分光光度計的使用對酶活力的快速准確的測定提供的極大的方便。
⑤放射測量法 是酶活力測定中較常用的一種方法。一般用放射性同位素標記底物,在反應進行到一定程度時,分離帶放射性同位素標記的產物並進行測定,就可測知反應進行的速度。常用的同位素有3H,14C,32P,35S,131I等。如脲酶,將底物尿素用14C標記,產生的帶放射性的CO2氣體可用標准計數法進行測定。
⑥酶偶聯分析 某些酶本身沒有合適的測定方法,但可偶聯另一個酶反應進行測定。其基本方法為:應用某一高度專一性的工具酶使被測酶反應能繼續進行到某一可直接連續且簡便准確測定階段的方法。如:被測E1反應的產物B是某一脫氫酶(E2)的底物,向反應體系中加入足量的脫氫酶和NAD+或NADPH+,使反應由A經B繼續進行到C,然後測定NADH或NADPH的特徵吸收光譜的變化,即可間接地測定E1的活力大小。如己糖激酶的活力測定即應用這一方法。注意:使用該法要求指示酶必須很純,且具有高度的專一性,以免干擾反應而給測定帶來麻煩。

6、請問5%的纖維素酶溶液怎麼配?急、謝謝!

固體溶解的話是可以這么算的

7、配置纖維素酶的過程

下面以配置6mg/g溶液為例!
6mg/g指你量取的溶液每克之中含有6毫克。
天平稱0.6克纖維素酶,再稱或量取溶液99.4克。
溶解即得所需溶液。

滿意請採納~!

8、纖維素酶活是5000IU/g,我量取了3ml用500ml蒸餾水稀釋了,用的時候取了8ml,請問我要怎樣表示我的酶用量

實際的酶活與所標注的是有很大的區別的,建議可以自己檢測一下,不知是FPA,還是CMC,你需要弄清的就是1ml裡面有多少IU的cellulase,這樣的話好換算,因為1g cellulase可能不只1ml

9、纖維素酶活力用什麼方法測定

纖 維 素 酶 是 一 種 復 合 酶 。 酶 系 包 括 外 切 B-1.4- 葡 聚 糖 酶 ( ExoB-1.4glucanase,EC3.2.1.9 ) 內 切 B-1.4 葡 聚 糖 酶 ( Endo β -1.4-glucanase,EC1.2.1.4) 和纖維二糖酶。纖維素酶在一定溫度和 PH 條件下, 將纖維素酶底物(濾紙或羥甲基纖維素鈉)水解,釋放出還原糖。在鹼性,煮沸 條件下,3.5-二硝基水楊酸(DNS 試劑)與還原糖發生顯色反應,其顏色的深淺 與還原糖(與葡萄糖汁)含量成正比。通過在 540nm 測定吸光度,可得到產生還 原糖的量,計算出纖維素酶的 FPA 酶和 CMCA 酶活力,以此代表纖維素酶的酶活 力。

與纖維素酶活cms溶液相關的知識