1、怎樣預處理用SEM看粒子大小
關於怎樣預處理用SEM看粒子大小問題，上海獻峰網路指出：
1、葯物與輔料的性質要相近進行粉末直接壓片時，葯物與輔料的堆密度、粒度及粒度分布等物理性質要相近，以利於混合均勻，尤其是規格較小、需測定含量均勻度的葯物，必須慎重選擇各種輔料。
2、不溶性潤滑劑須最後加入用於粉末直接壓片的不溶性潤滑劑一定要最後加入，即先將原料與其它輔料混合均勻後，再加入不溶性潤滑劑，並且要控制好混合時間，否則會嚴重影響崩解或溶出。另外，以預膠化澱粉、微晶纖維素等為輔料時，硬脂酸鎂的用量如果較多且混合時間較長，片劑有軟化現象，所以一般用量應在0.75％以下，而且要對混合時間、轉速及強度進行驗證。
3、混合後要進行含量測定與常規濕法制粒的生產工藝一樣，進行粉末直接壓片的各原輔料混合後要進行含量測定，以確保中間產品和成品的質量符合規定標准。
4、小試後須進行充分的試驗放大一般情況下，用粉末直接壓片工藝壓制的不合格片劑不宜返工。因為返工須將片劑重新粉碎，粉碎後物料的可壓性會顯著降低，以致不適於進行直接壓片。所以，從小試至大生產，必須進行中試，並經過充分的驗證，且中試應採用與以後大生產相同類型的設備，以使確定的參數對大生產有指導作用。
5、微晶纖維素的使用片劑硬度和脆碎度不合格時，可以加入微晶纖維素，其用量可高達65％；還可以採用先壓成大片，然後破碎成顆粒，再行壓片的方法，可得到滿意的結果。
6、及時處理壓片中的異常情況在壓片過程中，應按標准操作程序及時取樣，觀察片劑的外觀及測定片重差異、硬度、脆碎度、崩解時間、片厚等質量指標，並觀察設備運行情況，出現異常情況應及時報告並採取應急措施，詳細記錄異常現象和處理結果，進行詳細的分析，以確保產品質量。
2、如何用SEM看無機粒子在樹脂中的分散,就是要如何來處理壓片表面???
1、葯物與輔料的性質要相近進行粉末直接壓片時，葯物與輔料的堆密度、粒度及粒度分布等物理性質要相近，以利於混合均勻，尤其是規格較小、需測定含量均勻度的葯物，必須慎重選擇各種輔料。
2、不溶性潤滑劑須最後加入用於粉末直接壓片的不溶性潤滑劑一定要最後加入，即先將原料與其它輔料混合均勻後，再加入不溶性潤滑劑，並且要控制好混合時間，否則會嚴重影響崩解或溶出。另外，以預膠化澱粉、微晶纖維素等為輔料時，硬脂酸鎂的用量如果較多且混合時間較長，片劑有軟化現象，所以一般用量應在0.75％以下，而且要對混合時間、轉速及強度進行驗證。
3、混合後要進行含量測定與常規濕法制粒的生產工藝一樣，進行粉末直接壓片的各原輔料混合後要進行含量測定，以確保中間產品和成品的質量符合規定標准。
4、小試後須進行充分的試驗放大一般情況下，用粉末直接壓片工藝壓制的不合格片劑不宜返工。因為返工須將片劑重新粉碎，粉碎後物料的可壓性會顯著降低，以致不適於進行直接壓片。所以，從小試至大生產，必須進行中試，並經過充分的驗證，且中試應採用與以後大生產相同類型的設備，以使確定的參數對大生產有指導作用。
5、微晶纖維素的使用片劑硬度和脆碎度不合格時，可以加入微晶纖維素，其用量可高達65％；還可以採用先壓成大片，然後破碎成顆粒，再行壓片的方法，可得到滿意的結果。
6、及時處理壓片中的異常情況在壓片過程中，應按標准操作程序及時取樣，觀察片劑的外觀及測定片重差異、硬度、脆碎度、崩解時間、片厚等質量指標，並觀察設備運行情況，出現異常情況應及時報告並採取應急措施，詳細記錄異常現象和處理結果，進行詳細的分析，以確保產品質量。
3、求論文《水稻秸稈纖維素發酵轉化燃料乙醇的研究》
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水稻秸稈纖維素發酵轉化燃料乙醇的研究
摘要
我國水稻秸稈資源豐富，年產量達3億多噸。利用水稻秸稈生產燃料乙醇，對
來我國能源問題、實現節糧代糧和環保有著巨大的潛力和廣闊的應用前景。水稻秸
要成分是纖維素，對纖維素的利用最主要的限制性因素是將纖維素轉化為可發酵還
解決的辦法主要有兩類途徑:(l)提高纖維素酶生產的經濟性，主要涉及纖維素酶高
獲得及纖維素酶的生產技術，提高其合成效率以降低單位纖維素酶生產成本;(2)提
素酶利用效率，主要涉及纖維素酶解催化過程，以降低單位可發酵還原糖生產成本
本研究從菌種的選育著手，研究了菌株的產酶特性，用響應面策略優化發酵培養基，
了SL發酵罐分批發酵生產高活力纖維素酶技術;分離純化了纖維素酶;構建了代
二糖的釀酒酵母工程菌;對釀酒酵母工程菌細胞固定化發酵進行了研究，利用二級
生物反應器禍合系統生物協同酶解水稻秸稈發酵生產燃料乙醇等。主要研究結果如
1.篩選到一株纖維素酶高產菌株(PenicilliumYT01)，原生質體紫外誘變後
變株YT02，YT02以水稻秸稈為碳源，豆餅粉和硫酸錢為氮源，在29」c，初始p
酵12Oh，纖維素酶活力達到最高，搖瓶發酵濾紙酶活(FPA)、CMC酶活(CMcas
葡萄糖昔酶活(CB)分別達3.86IU/mL、207.41IU/mL和l.4oIU/mL。
2.用響應面方法(RSM)優化的發酵培養基組成為:水稻秸稈為41.95留L，
為24.83g/L，數皮為22.16叭，困H4)2504、KHZpO4為4g/L，MgSO;為0.sg/L;起始
以優化的培養基發酵120h，濾紙酶活、cMc酶活和p一葡萄糖普酶活分別達到
IU/mL、357.41IU/mLand3.704IU/mL。遠高於優化前的纖維素酶活水平。
3.在SL發酵罐中研究了溫度、pH值和溶氧對菌體生長和產酶的影響，確定
發酵的工藝條件為:0一32h時發酵溫度犯」C，溶氧70%;犯h至1加h發酵結果發
29oc，溶氧50%，發酵液初始pH值6.0，發酵%h濾紙酶活、CMC酶活和p一葡
酶活分別達到11.13IU/mL、465.24IU/mLand4.08IU/mL，均高於搖瓶發酵水平，
酵動力學過程顯示，突變菌YT02菌體生長和纖維素酶各組分均為部分禍聯。
4.利用DEAEsephadexA一25和sephadexG一75分離純化了二個內切葡
(CMCase)和一個p一葡萄糖營酶，CMCase純化倍數為13.48，回收率為10.54%，
糖昔酶純化倍數為18.62，回收率為8.62%，經SDS一PAGE得到單蛋白分子條帶，
I
、滬』_心鉗3卜「』門屍，..
量測定分別為73kDa、43kDa和57.8kDa，並對其進行了N端測序和質譜分析。
5.以生產乙醇性能優良的釀酒酵母菌株NAN一27作為工程菌株的受體菌。利用
能良好的多拷貝整合型載體pYMIKP，使纖維二糖代謝基因BGLI整合到釀酒酵母
體上。從而在釀酒酵母工業菌株中建立了穩定的纖維二糖代謝途徑，拓展了酒精生
物利用范圍，降低了纖維二糖對纖維素酶解的抑製作用。採用海藻酸鈣凝膠包埋固
纖維二糖釀酒酵母工程菌，固定化細胞與游離細胞相比，發酵時間縮短，乙醇產率提
以上，並能有效地利用水稻秸稈水解液進行酒精發酵。
6.對水稻秸稈酶解過程中底物性質、酶解溫度、酶解pH、底物濃度及纖維素
等關鍵因子進行了研究。由於YT02纖維素酶系中纖維二搪酶活力較低(CB/F隊為
經稀酸稀鹼預處理後的水稻秸稈纖維素對乙醇轉化率僅為18%。採用代謝纖維二糖
母工程菌游離細胞發酵，可部分去除纖維二糖對酶解的抑制，水稻秸稈纖維素對乙
率可提高至20%。進一步利用採用海藻酸鈣凝膠包埋固定代謝纖維二糖釀酒酵母工
酵，水稻秸稈纖維素對乙醇轉化率可達26%。這方面的研究結果有助於深入了解纖
的協同降解機制。
7.將纖維原料的酶解、固定化代謝纖維二搪釀酒酵母工程菌的作用有機禍聯，
新型的二級串聯式生物反應器，在該反應器體系的協同作用下，可有效解除纖維二
萄糖對纖維素酶的反饋抑製作用，促進纖維原料水稻秸稈的酶水解，發酵40h，乙
達25.5留L，纖維素對乙醇的轉化率達43.0%(纖維素對乙醇的理論轉化率為56.61
是游離細胞同時糖化發酵(SSF)的1.65倍，生產效率達0.64留(Lh)。採用分批添料
酶解發酵工藝，可提高纖維底物的終濃度達250歲L，產物乙醇的終濃度66.51留L，
高了纖維素酶的利用率和乙醇生產效率，降低乙醇的生產成本。該反應器性能穩定
效率高，固定化細胞可以重復使用，便於自動化控制。
關鍵詞:纖維素酶，水稻秸稈，釀酒酵母，燃料乙醇，串聯式生物反應器
目錄
摘要..............................................................……
ABSTRACT..........................................................……IH
第一章文獻綜述
l水稻秸稈資源及其降解方式............................................……l
1.1水稻秸稈的組成與結構..…，................................……，.……l
1.2水稻秸稈的預處理..................................................……3
1.2.1物理方法預處理水稻秸稈..........................................……3
1.2.2化學方法預處理水稻秸稈..........................................……3
1.2.3生物方法預處理水稻秸稈..........................................……4
1.3水稻秸稈纖維素的降解方式..........................................……4
1.3.1水稻秸稈的酸水解................................................……5
1.3.2水稻秸稈的酶水解................................................……5
2纖維素酶的性質與用途................................................……6
2.1纖維素酶的多酶體系................................................……6
2.2纖維素酶的分子結構................................................……7
2.3纖維素酶的作用機理................................................……9
2.4纖維素酶的分子量大小.............................................……10
2.5纖維素酶的最適反應條件與穩定性...................................……11
2.6纖維素酶的應用...................................................……H
3纖維素酶的生產.....................................................……12
3.1纖維素酶的生產菌種選育...........................................……12
3.2纖維素酶的生產...................................................……14
4水稻秸稈原料生物轉化燃料乙醇.......................................……15
4.1燃料乙醇的優越性和使用現狀.......................................……15
4.2水稻秸稈纖維素生物轉化燃料乙醇的方法.............................……16
4.2.1分步水解發酵法生產燃料乙醇.....................................……16
4.2.2同步糖化發酵法生產燃料乙醇.....................................……16
i
4.2.3固定化細胞發酵生產燃料乙醇.....................................……17
4.3酉良酒酵母途徑工程應用於燃料乙醇的生產.............................……17
5本研究的目的、意義和主要內容.......................................……19
5.1本研究的目的和意義...............................................……19
5.2本研究的思路和技術路線...........................................……20
5.3本研究的主要內容.................................................……21
第二章纖維素酶高產菌株的選育及產酶條件研究.........................……23
1材料與方法..........................................................……23
1.1材料.............................................................……23
1.1.1試劑與溶液配製.................................................……器
1.1.2菌種與菌種分離源...............................................……24
1.1.3培養基.........................................................……24
1.1.4主要儀器與設備.................................................……25
1.2方法.............................................................……25
1.2.1水稻秸稈的預處理...........................……，.，...........……25
1.2.2纖維素酶高產菌的分離與純化.....................................……25
1.2.3纖維素酶高產菌的初步鑒定.......................................……25
1.2.4纖維素酶高產菌的原生質體紫外誘變...............................……25
1.2.5YTOZ產纖維素酶的液體發酵培養方法...............................……26
1.2.6不同預處理水稻秸稈的酶水解.....................................……27
1.2.7分析方法.......................................................……27
2結果與分析.........................................................……29
2.1不同預處理水稻秸稈的各組分含量...................................……29
2.2纖維素酶高產菌的分離與篩選.......................................……29
2.3纖維素高產菌YT01的菌種鑒定......................................……31
2.4纖維素酶高產菌YT01的原生質體紫外誘變............................……31
2.5液體發酵培養基成分與發酵條件對YT02產纖維素酶的影響..............……32
2.5.1不同碳源對YT02產酶的影響......................................……32
2.5.2不同預處理水稻秸稈對YT02產酶的影響............................……33
2.5.3不同氮源對YT02產纖維素酶的影響................................……34
ii
2.5.4微晶纖維素添加量對YT02產纖維素酶的影響........................……35
2.5.5不同無機鹽對YT01產纖維素酶的影響..............................……35
2.5.6起始pH對YT01產纖維素酶的影響.................................……36
2.5.7裝液量對YT02產纖維素酶的影響..................................……37
2.5.8轉速對YT02產纖維素酶的影響....................................……37
2.5.9培養溫度對YT02產纖維素酶的影響................................……38
2.5.10接種量對YT02產纖維素酶的影響.................................……39
2.5.n培養時間對YT02產酶的影響.....................................……40
2.6纖維素酶的酶學性質研究...........................................……41
2.6.1溫度對纖維素酶各組分酶活的影響................................……41
2.6.ZPH對纖維素酶各組分酶活的影響..................................……41
2.7纖維素酶對不同預處理水稻秸稈的酶解試驗...........................……42
3結論與討論...............................................··········……4:l
3.1關於篩選出的纖維素酶高產菌株....................................……4:3
3.2纖維素酶生產菌的改造............................................……招
3.3青黴YT02產酶條件與酶學特性.....................................……44
第三章YT02產纖維素酶發酵培養基的優化研究..........................……45
1材料與方法....................................···.·················……45
1.1材料.............................................................……45
1.1.1試劑................................................·.·.·······……45
1.1.2供試菌種.......................................················……45
1.1.3培養基................................................·········……45
1.1.4主要儀器與設備.................................................……46
1.2方法.............................................................……4盡
1.2.1實驗設計.............................................··········……46
1.2.2培養方法.............................................··········……46
1.2.3分析方法.......................................................……46
2結果與分析..............................................···········……47
2.1部分因子實驗篩選發酵培養基的主要影響因子.........................……47
2.2最陡爬坡實驗逼近發酵培養基最優點.................................……50
111
2.3中心組合設計優化YT02發酵培養基組成..............................……51
2.4發酵過程中PH、殘余還原糖與纖維素酶變化的測定結果.................……59
3結論與討論...................................……，...............……61
第四章YT02分批發酵產纖維素酶的研究................................……63
材料與方法.........................................................……63
.1材料.............................................................……63
.1.1試劑...........................................................……63
.1.2菌株...........................................................……63
.1.3培養基.........................................................……娜
.1.4主要儀器.......................................................……64
方法.....................·······……
.1用於分批發酵的種子培養.........……
.…64
.…64
1.2.2恆溫分批發酵對YT02產纖維素酶的影響.............................……64
1.2.3變溫分批發酵對YT02產纖維素酶的影響.............................……64
1.2.4溶氧量對YT02分批發酵產纖維素酶的影響...........................……64
1.2.5分段溶氧對YT02分批發酵產纖維素酶的影響.........................……65
1.2.6分析方法.......................................................……65
2結果與分析.........................................................……65
2.1發酵溫度對YT02產纖維素酶的影響結果..............................……65
2.2變溫發酵對YT02產纖維素酶的影響結果..............................……68
2.3溶氧對YT02產纖維素酶的影響結果..................................……69
2.4分段溶氧分批發酵對YT02產纖維素酶的影響結果......................……72
3結論與討論.........................................................……73
第五章YT02產纖維素酶的分離純化及酶學性質研究...........……
以U（b叮『叮『
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材料與方法…
.1材料.……
.1.1試驗材料.
.1.2主要試劑.
....……76
.....……76
.3常用儲備液及緩沖液....................................……
1.1.4主要儀器........................................................……78
1.2方法..............................................................……78
1.2.1蛋白質濃度的測定方法...........................................……78
1.2.2纖維素酶的分離純化.............................................……79
1.2.3纖維素酶SDS一PAGE凝膠電泳純化及酶相對分子量的測定..............……83
1.2.4酶蛋白的N端測序...............................................……85
1.2.5酶蛋白的質譜分析...............................................……86
2結果與分析.........................................................……87
2.1DEAE一SephadexA一25陰離子交換層析結果.............................……87
2.1.1層析收集管酶蛋白同洗脫緩沖液NaCI濃度的關系.....................……87
2.1.2層析收集管酶蛋白活性檢測.......................................……88
2.25即hadexG一75分子篩凝膠過濾層析結果..............................……88
2.2.1SephadexG一75分子篩凝膠過濾層析分離酶蛋白......................……88
2.2.2分子篩凝膠過濾層析纖維素酶活測定結果...........................……88
2.3纖維素酶各純化步驟純化情況.......................................……89
2.4SDS一PAGE聚丙烯酸胺凝膠電泳.......................................……90
2.4.1SDS一PAGE聚丙烯酸胺凝膠電泳銀染結果.............................……90
2.4.2纖維素酶分子量SDS一PAGE凝膠電泳測定結果........................……91
2.5酶蛋白的N端測序結果.............................................……91
2.6酶蛋白的質譜分析結果.............................................……93
3結論與討論.........................................................……94
第六章釀酒酵母纖維二糖代謝途徑的構建及其細胞固定化研究.............……96
材料和方法................................................·········……%
1材料.............................................................……96
1.1菌株和質粒.....................................................……96
1.2分子克隆用酶和試劑.............................................……96
1.3水稻秸稈水解液的制備...........................................……97
2方法.............................................................……98
2.1含纖維二糖酶基因(及咒1)的重組質粒pYMIKP一那藝了的構建方法.......……98
2.2釀酒酵母纖維二糖代謝途徑的搭建方法.............................……99
1.2.3釀酒酵母工程菌細胞的固定化方法................................……101
1.2.4固定化酵母細胞發酵方法........................................……102
1.2.5分析方法......................................................……102
2結果與分析........................................................……103
2.1表達及范了基因的重組菌株的構建結果...............................……103
2.1.1目的基因及法了的獲得...........................................……103
2.1.2含目的基因那Z了重組質粒的構建.................................……103
2.1.3釀酒酵母工業菌株NAN一27轉化子的獲得二，........................……104
2.1.4轉化子NAN一28細胞纖維二糖酶活性測定結果.......................……1()4
2.2不同固定化條件對NAN一28細胞固定化的影響結果.....................……105
2.2.1不同溶劑對固定化細胞轉化纖維二搪的測定結果......……，.......……105
2.2.2不同海藻酸鈉濃度對固定化細胞凝膠特性的影響....................……l()5
2.2.3酵母包埋量對固定化細胞轉化纖維二糖的影響結果..................……!06
2.3固定化細胞與游離細胞分批發酵實驗結果............................……l()6
2.4固定化細胞重復分批發酵試驗結果..................................……107
3結論與討論........................................................……108
3.1酉良酒酵母纖維二糖代謝途徑的構建.................................……108
3.2釀酒酵母工程菌細胞固定化.......................................……110
第七章串聯式生物反應器轉化水稻秸稈生產燃料乙醇的研究..............……112
材料與方法........................................................……112
l材料......................................……，..............……112
1.1試劑.........................................................……112
1.2菌種.........................................................……112
1.3主要儀器與設備...............................................……112
2方法...........................................................……112
2.1稻草粉的預處理................................................……112
2.2纖維素酶的制備................................................……113
2.3稻草粉的酶解糖化..............................................……113
2.4水稻秸稈生物轉化燃料乙醇......................................……114
2.5測定方法......................................................……115
vi
2結果與分析........................................................……116
2.1不同預處理方法對水稻秸稈糖化效果的影響結果......................……116
2.2不同溫度對水稻秸稈糖化效果的影響結果............................……116
2.3不同pH對稻草粉糖化效果的影響結果...............................……117
2.4不同加酶量對稻草粉糖化效果的影響結果............................……118
2.5不同底物濃度對稻草粉糖化效果的影響結果..........................……118
2.6水稻秸稈同步糖化發酵(SSF)結果.................................……119
2.7串聯式反應器轉化水稻秸稈生產乙醇................................……120
2.7.1固定化NAN一28細胞發酵生產燃料乙醇結果.........................……120
2.7.2串聯式生物反應器的穩定性結果..................................……121
2.7.3分批添料式協同酶解發酵生產燃料乙醇結果........................……122
3結論與討論......................................................··……122
3.1二級串聯式生物反應器生產乙醇....................................……122
3.2分批添料式協同酶解發酵工藝......................................……123
3.3水稻秸稈資源的全利用............................................……123
第八章結論.....................................................……124
主要參考文獻......................................................……126
英文縮寫與主要符號表...............................................……146
本研究的特色與創新.................................................……147
發表與待發表的學術論文及成果.......................................……148
致謝............................................................……149
作者簡介..........................................................……150
你要看哪部分？
4、壓制前粉末料需要進行哪些預處理
退火，篩分，混合，制粒，加潤滑劑和成形濟
5、sem測試納米粒子在樹脂中的分散用固化好的樹脂還是未經固化的
1、葯物與輔料的性質要相近進行粉末直接壓片時，葯物與輔料的堆密度、粒度及粒度分布等物理性質要相近，以利於混合均勻，尤其是規格較小、需測定含量均勻度的葯物，必須慎重選擇各種輔料。
2、不溶性潤滑劑須最後加入用於粉末直接壓片的不溶性潤滑劑一定要最後加入，即先將原料與其它輔料混合均勻後，再加入不溶性潤滑劑，並且要控制好混合時間，否則會嚴重影響崩解或溶出。另外，以預膠化澱粉、微晶纖維素等為輔料時，硬脂酸鎂的用量如果較多且混合時間較長，片劑有軟化現象，所以一般用量應在0.75％以下，而且要對混合時間、轉速及強度進行驗證。
3、混合後要進行含量測定與常規濕法制粒的生產工藝一樣，進行粉末直接壓片的各原輔料混合後要進行含量測定，以確保中間產品和成品的質量符合規定標准。
4、小試後須進行充分的試驗放大一般情況下，用粉末直接壓片工藝壓制的不合格片劑不宜返工。因為返工須將片劑重新粉碎，粉碎後物料的可壓性會顯著降低，以致不適於進行直接壓片。所以，從小試至大生產，必須進行中試，並經過充分的驗證，且中試應採用與以後大生產相同類型的設備，以使確定的參數對大生產有指導作用。
5、微晶纖維素的使用片劑硬度和脆碎度不合格時，可以加入微晶纖維素，其用量可高達65％；還可以採用先壓成大片，然後破碎成顆粒，再行壓片的方法，可得到滿意的結果。
6、及時處理壓片中的異常情況在壓片過程中，應按標准操作程序及時取樣，觀察片劑的外觀及測定片重差異、硬度、脆碎度、崩解時間、片厚等質量指標，並觀察設備運行情況，出現異常情況應及時報告並採取應急措施，詳細記錄異常現象和處理結果，進行詳細的分析，以確保產品質量。